pEGFP-N1质粒是一种常用的哺乳动物表达载体,广泛应用于基因表达研究和细胞生物学实验。该质粒由Clontech公司开发,具有以下主要特点:1.载体骨架:基于pUC质粒构建,具有高拷贝复制特性,便于DNA扩增和提取。2.启动子:包含CMV(巨细胞病毒)立即早期启动子,可在多种哺乳动物细胞中驱动外源基因的高效表达。3.报告基因:含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,便于通过荧光显微镜直接观察转染效率。4.多克隆位点:位于EGFP基因上游,允许外源基因插入并与EGFP形成融合蛋白或独立表达。5.筛选标记:含有新霉素抗性基因(NeoR),可用于G418筛选稳定转染的细胞系。6.其他元件:包含SV40早期启动子、pUC复制起点、f1复制起点等。pEGFP-N1质粒大小约为4.7kb,适用于瞬时转染和稳定转染实验,是研究基因功能、蛋白定位和细胞信号通路的常用工具。