pUC18和pUC19是两种广泛使用的克隆载体质粒,属于pUC系列。它们由大肠杆菌质粒pBR322改造而来,具有高拷贝数的特点,适用于分子克隆和DNA重组实验。这两种质粒的主要区别在于多克隆位点(MCS)的排列方向相反。pUC18的MCS方向与lacZα报告基因的转录方向相同,而pUC19的MCS方向则相反。这种设计差异为实验提供了更多灵活性,可以根据需要选择合适的方向进行克隆。pUC18和pUC19都含有以下关键元件:1.氨苄青霉素抗性基因(AmpR),用于筛选转化子2.lacZα片段,用于蓝白斑筛选3.多克隆位点(MCS),包含多个限制性内切酶识别位点4.高拷贝数的复制起点(ori)这些质粒的典型大小约为2.7kb,由于其小巧的尺寸和高拷贝数特性,使其成为分子生物学实验中常用的工具。蓝白斑筛选系统通过β-半乳糖苷酶的α互补现象,可以方便地识别重组子与非重组子。
