酶切位点及保护碱基简介酶切位点是指限制性内切酶能够识别并切割DNA双链的特定核苷酸序列。不同的限制性内切酶识别不同的酶切位点，这些位点通常具有回文结构（对称序列）。例如，EcoRI的识别序列为GAATTC。保护碱基是在设计PCR引物或合成DNA片段时，在酶切位点序列外侧额外添加的碱基。它们的作用是提供足够的空间，确保限制性内切酶能够有效结合并切割DNA。通常添加2-3个保护碱基即可提高酶切效率。在实际应用中，正确选择酶切位点和添加适当的保护碱基对分子克隆、载体构建等实验至关重要。