MS培养基的配制与灭菌实验是植物组织培养中的基础操作,主要分为以下步骤:1.**准备工作**:检查实验所需的试剂、仪器和器皿是否齐全,包括MS培养基母液、琼脂、蔗糖、蒸馏水、pH计、磁力搅拌器、电子天平等。2.**配制培养基**:-按照配方计算所需母液的体积,依次加入大量元素、微量元素、铁盐、有机成分等。-加入蔗糖(通常30g/L)和琼脂(6-8g/L),用蒸馏水定容至所需体积。-调节pH至5.8左右(使用1MNaOH或HCl)。3.**分装与灭菌**:-将配制好的培养基分装至培养瓶或试管中,避免液体沾到瓶口。-用牛皮纸或封口膜封口,防止污染。-放入高压灭菌锅,121℃灭菌15-20分钟。4.**冷却与保存**:灭菌后取出培养基,待其凝固后存放于4℃冰箱备用。注意事项:-操作过程需严格无菌,避免污染。-灭菌后检查培养基是否均匀凝固,若出现浑浊或沉淀需重新配制。-记录配制过程中的关键参数,如pH、灭菌时间等。
