pMAL-c5x是大肠杆菌表达载体系统,由NewEnglandBiolabs公司开发,主要用于可溶性重组蛋白的高效表达与纯化。该载体利用麦芽糖结合蛋白(MBP)作为融合标签,显著提高目标蛋白的溶解性,特别适用于难表达蛋白。pMAL-c5x包含以下关键元件:1.**malE基因**:编码MBP标签,与目标蛋白N端融合表达2.**tac强启动子**:IPTG诱导调控3.**多克隆位点**:位于MBP编码序列下游,方便插入目标基因4.**His-tag**:可选6×His标签用于镍柱纯化5.**FactorXa蛋白酶切位点**:用于去除MBP标签优势包括增强蛋白可溶性、简化纯化流程(通过直链淀粉树脂亲和层析),且载体提供多种蛋白酶切位点。适用于需要改善表达或溶解性的重组蛋白生产。
