pET-28a()是一种常用的大肠杆菌表达载体,适用于重组蛋白的高效表达。该载体由Novagen公司开发,属于pET系列载体之一。pET-28a()具有T7启动子,能够在大肠杆菌中实现高水平的外源蛋白表达。载体包含卡那霉素抗性基因(KanR),便于筛选阳性克隆。此外,pET-28a()在多克隆位点两侧设计了His-Tag序列(N端和C端),方便通过镍柱亲和层析纯化重组蛋白。载体还含有T7终止子、lac操纵子序列和f1噬菌体复制起点。pET-28a()的分子大小约为5369bp,适合克隆中等大小的外源基因片段。该载体需要与表达T7RNA聚合酶的宿主菌(如BL21(DE3))配合使用,通过IPTG诱导实现目的蛋白的表达。
