中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是中性粒细胞在特定刺激下释放的由DNA、组蛋白和颗粒蛋白组成的网状结构,在先天免疫和炎症反应中发挥重要作用。建立体外诱导和检测NETs的方法对于研究其形成机制和功能至关重要。该方法通常包括从外周血中分离中性粒细胞,使用佛波酯(PMA)、脂多糖(LPS)或钙离子载体等刺激剂诱导NETs形成,然后通过多种技术进行检测和分析。常用的检测方法包括荧光显微镜观察(使用DNA染料如SYTOXGreen或DAPI)、免疫荧光染色(检测NETs相关蛋白如组蛋白和中性粒细胞弹性蛋白酶)以及定量分析(如PicoGreen测定DNA释放量)。此外,还可以通过扫描电镜或共聚焦显微镜观察NETs的超微结构。这些方法为研究NETs在感染、自身免疫疾病和血栓形成等病理过程中的作用提供了重要工具。
