核酸序列依赖性扩增技术（NASBA）是一种用于体外扩增核酸的等温扩增技术，主要用于RNA的检测和扩增。该技术由Compton于1991年首次提出，其核心特点是不需要传统PCR的热循环步骤，能够在恒定温度（通常为41°C）下进行扩增。NASBA技术依赖于三种关键酶：逆转录酶（RT）、RNaseH和T7RNA聚合酶，通过这些酶的协同作用实现目标RNA序列的指数级扩增。NASBA的工作流程包括以下几个主要步骤：首先，逆转录酶以目标RNA为模板合成cDNA；随后，RNaseH降解RNA链，形成单链cDNA；接着，逆转录酶以cDNA为模板合成双链DNA，其中一条链包含T7启动子序列；最后，T7RNA聚合酶识别启动子并转录生成大量RNA产物，这些产物可以再次进入扩增循环，从而实现高效扩增。NASBA技术具有高灵敏度、快速扩增（通常1-2小时内完成）和良好的特异性，特别适用于RNA病毒的检测，如HIV、流感病毒和SARS-CoV-2等。此外，由于其在等温条件下进行，无需复杂的热循环设备，因此在现场检测和资源有限的环境中具有广泛应用前景。
