共聚焦和超分辨率显微荧光图像的共定位分析是生物医学研究中一项重要的技术手段,用于研究不同分子或结构在细胞内的空间分布关系。共聚焦显微镜通过光学切片技术提高了图像的分辨率,而超分辨率显微技术(如STED、PALM、STORM等)则突破了光学衍射极限,能够达到纳米级的分辨率。这两种技术的结合为共定位分析提供了更精确的数据基础。共定位分析通过计算荧光信号的重叠程度,可以量化分子间的相互作用或共存情况,广泛应用于蛋白质相互作用、细胞器定位、信号传导通路等研究领域。然而,不同显微技术的分辨率差异、图像处理算法以及定量分析方法的选择都会对共定位结果产生影响。本文将对共聚焦和超分辨率显微荧光图像的共定位分析方法进行探讨,比较不同技术的优缺点,并介绍常用的共定位分析指标和注意事项,为相关研究提供参考。