EDC(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺)与NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)交联是一种常用的生物共价偶联方法,主要用于蛋白质、多肽或其他生物分子的修饰与连接。其原理如下:1.**EDC活化羧基**:EDC首先与目标分子(如蛋白质)上的羧基(-COOH)反应,形成不稳定的O-酰基异脲中间体。2.**NHS稳定中间体**:由于O-酰基异脲容易水解,加入NHS可将其转化为更稳定的NHS酯,提高反应效率。3.**与氨基偶联**:活化的NHS酯随后与另一分子(如抗体或配体)上的氨基(-NH₂)反应,形成稳定的酰胺键(-CO-NH-),实现共价交联。该方法广泛应用于生物标记、免疫检测、药物偶联等领域,具有高效、温和(通常在pH4.5-7.5条件下进行)的特点。
