DNA滚环扩增技术(RollingCircleAmplification,RCA)是一种高效的等温核酸扩增方法,近年来在分子生物学、诊断学和纳米技术领域取得了显著进展。该技术利用环状DNA模板和具有链置换活性的DNA聚合酶(如Phi29),通过持续延伸产生长链重复序列,具有高特异性、灵敏度和操作简便等优势。近年来,RCA技术的研究进展主要集中在以下几个方面:1.**多重检测与信号放大**:结合荧光标记、纳米材料或CRISPR系统,显著提高了核酸检测的灵敏度和多重分析能力,广泛应用于病原体检测和癌症标志物筛查。2.**功能化应用拓展**:通过设计功能性引物或模板,RCA被用于构建DNA纳米结构、生物传感器及药物递送系统,推动合成生物学与纳米医学的发展。3.**微流控与便携化**:与微流控芯片结合,实现了快速、低成本的现场检测(如POCT),在传染病监测和食品安全领域展现出潜力。4.**新型酶与模板优化**:开发耐热性更强的聚合酶和稳定修饰的环状模板,进一步提高了扩增效率和产物多样性。未来,RCA技术有望在单细胞分析、高通量测序和智能诊疗中发挥更大作用,但其标准化和规模化应用仍需克服引物设计、非特异性扩增等技术挑战。