利用偶氮酪蛋白测定内切蛋白酶酶活是一种常用的酶活性检测方法。该方法基于偶氮酪蛋白作为底物，内切蛋白酶能够特异性水解偶氮酪蛋白中的肽键，释放出含有偶氮基团的可溶性片段。通过离心去除未水解的偶氮酪蛋白后，上清液中的可溶性偶氮片段在特定波长（通常为440nm）下具有光吸收特性，其吸光度值与酶活性成正比。因此，通过测定反应液的吸光度变化，可以定量计算内切蛋白酶的活性。该方法操作简便、灵敏度高，适用于多种内切蛋白酶的活性测定。