转录起始位点（TranscriptionStartSite,TSS）的测定是分子生物学和基因组学研究中的重要环节，用于确定基因转录的精确起始位置。TSS的定位对于理解基因表达调控机制、启动子结构以及转录因子结合位点的功能至关重要。测定TSS的常用方法包括：1.**5'RACE（RapidAmplificationofcDNAEnds）**：通过逆转录和PCR扩增cDNA的5'端，结合测序技术确定TSS。2.**CapAnalysisGeneExpression(CAGE)**：利用5'端帽子结构捕获技术，结合高通量测序，在全基因组范围内鉴定TSS。3.**RNA-seq（RNA测序）**：通过分析RNA测序数据中的5'端富集信号，推断TSS位置。4.**PrimerExtension**：使用放射性或荧光标记的引物延伸至mRNA的5'端，通过电泳确定TSS。5.**Oligo-capping**：通过酶法去除mRNA的5'端非帽子结构，再连接特定寡核苷酸，辅助TSS鉴定。这些方法各有优缺点，适用于不同研究需求。准确的TSS测定有助于解析基因调控网络，并为疾病相关突变和表观遗传修饰的研究提供重要信息。
