外泌体是一种由细胞分泌的纳米级囊泡，广泛存在于各种体液中，如血液、尿液和细胞培养上清液。它们在细胞间通讯、疾病诊断和治疗中具有重要作用。以下是外泌体提取的常见方法及步骤简介：1.**差速离心法**：这是最常用的方法，通过逐步增加离心力去除细胞碎片和较大的囊泡，最终获得外泌体。步骤包括低速离心去除细胞和碎片，高速离心收集外泌体。2.**超滤法**：利用不同孔径的滤膜分离外泌体，操作简单且不需要昂贵设备，适合大规模样本处理。3.**密度梯度离心法**：通过蔗糖或碘克沙醇密度梯度离心，根据密度差异分离外泌体，纯度较高但操作复杂。4.**免疫亲和捕获法**：使用特异性抗体（如抗CD63、CD9）捕获外泌体，特异性高但成本较高。5.**商业试剂盒法**：如ExoQuick、TotalExosomeIsolation等试剂盒，操作简便且适合少量样本。提取后的外泌体可通过透射电镜（TEM）、纳米颗粒追踪分析（NTA）和Westernblot进行鉴定。选择方法时需考虑样本类型、下游应用及实验条件。
