pGEX-4T-1是一种常用的原核表达载体,由GEHealthcare公司开发。该载体主要用于在大肠杆菌中表达GST融合蛋白。载体大小为4.9kb,包含以下关键元件:1.**GST标签**:载体编码谷胱甘肽S-转移酶(GST),可与目标蛋白融合表达,便于后续纯化。2.**多克隆位点(MCS)**:位于GST基因下游,允许插入目标基因。3.**tac启动子**:受IPTG诱导调控,可高效启动融合蛋白表达。4.**凝血酶切割位点**:位于GST与目标蛋白之间,便于去除GST标签。5.**氨苄青霉素抗性基因(Amp^R)**:用于筛选阳性转化子。pGEX-4T-1适用于蛋白表达、纯化及功能研究,广泛应用于分子生物学和生物化学实验。